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技術(shù)文章

各種常見緩沖液的配制方法點(diǎn)擊次數(shù):12460 更新時間:2012-08-10

磷酸鹽緩沖液,Tris緩沖液和檸檬酸緩沖液等是生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用的緩沖液,也是PeproTech重組細(xì)胞因子和蛋白溶解所需的常用緩沖液。然而,這些緩沖液的配制比較麻煩,尤其當(dāng)要獲得特定pH值的緩沖液時,調(diào)節(jié)pH值是費(fèi)力、費(fèi)時的事情。對于Tris等緩沖液等,pH計是無法準(zhǔn)確測量其pH值的。

那么,有沒有簡便的方法來配制特定濃度和pH值的上述緩沖液呢?

美國PeproTech公司為此精心設(shè)計開發(fā)出一個網(wǎng)上實(shí)用工具--http://www.peprotech-asia.com/convertor/ch/phosphate.html。只要將你所需配置的濃度,pH值,以及配制的體積在上相應(yīng)的位置輸入或選定,即可計算出配制該溶液所需各組分的重量或體積,然后稱取相應(yīng)重量或體積的組分即可配制出您所需的緩沖液。

該網(wǎng)上工具包括以下內(nèi)容:
1) 配制磷酸鹽緩沖液
由一定量的Na2HPO4和NaH2PO4混合而得。

2) 配制檸檬酸(鹽)緩沖液
由Citric Acid(檸檬酸)和Trisodium Citrate(檸檬酸鈉)混合而得。

3) 配制醋酸溶液
在水中加入一定體積的醋酸而得。

4) 配制Tris緩沖液
由一定量的Tris HCl(Tris酸)和Tris Base(Tris堿)混合而得。

5) 重量與摩爾數(shù)轉(zhuǎn)換工具
已知一蛋白的分子量(kDa),可由重量推算出摩爾數(shù)和分子數(shù),以及在一定體積內(nèi)摩爾濃度。相反,也可由一個蛋白的摩爾數(shù)推算出重量和分子數(shù),以及由摩爾濃度推算出所含的蛋白質(zhì)量。

附:這些緩沖液在溶解PeproTech公司重組細(xì)胞因子和蛋白中的應(yīng)用舉例
1) 磷酸鹽緩沖液
1 x PBS用于溶解100-19 Human KGF 和100-52 Human FGF-23等。

2) 檸檬酸(鹽)緩沖液
5mM檸檬酸鈉(pH 8.0)用于溶解100-17A Human FGF-acidic, 10mM檸檬酸(pH 3.0)用于溶解100-21 Human TGF-b1等。

3) 醋酸溶液
10mM醋酸用于溶解120-10 Human Noggin和120-20 Human WISP-3等。

4) Tris緩沖液
5mM Tris(pH 7.6)用于溶解100-18B Human FGF-basic,10mM Tri(pH 8.0)用于溶解100-25 Human FGF-8。

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