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技術(shù)文章

熒光定量PCR試劑選擇指南點(diǎn)擊次數(shù):3044 更新時(shí)間:2021-03-11

實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù),是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)個(gè)PCR進(jìn)程,后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。市面上熒光定量試劑層出不窮,但是羅氏熒光定量試劑卻能永遠(yuǎn)脫穎而出,因?yàn)榱_氏熒光定量試劑可幫你在實(shí)時(shí)定量PCR中獲得高擴(kuò)增效率和高質(zhì)量熒光信號(hào),還保證結(jié)果準(zhǔn)度高。

  FastStart Essential 系列   

該系列是為不同儀器平臺(tái)優(yōu)化的無(wú)需ROX校正的高性能熒光定量PCR預(yù)混試劑,含兩類不同檢測(cè)方式的預(yù)混試劑,即染料法和探針法預(yù)混試劑。

1. FastStart聚合酶——從源頭上提升qPCR擴(kuò)增檢測(cè)效果

  • FastStart qPCR預(yù)混液通過化學(xué)修飾法進(jìn)行Taq DNA聚合酶的活性封閉及高溫啟動(dòng),無(wú)論是基于熒光染料法,還是水解探針法的檢測(cè),都可在實(shí)時(shí)定量PCR中獲得高擴(kuò)增效率和高質(zhì)量熒光信號(hào),定量結(jié)果準(zhǔn)度高。

2. 性能特點(diǎn)——高準(zhǔn)確度的基因研究結(jié)果源于以下幾點(diǎn)

  • 獲取高熒光信號(hào),使結(jié)果分析更為靈敏

  • 使用化學(xué)修飾熱啟動(dòng)的FastStart Taq DNA聚合酶,提升qPCR擴(kuò)增效率

  • 穩(wěn)定和可重復(fù)的結(jié)果,制備的反應(yīng)液可在室溫避光穩(wěn)定保存48 h再進(jìn)行檢測(cè)

  • 對(duì)于高GC含量或長(zhǎng)至500bp片段進(jìn)行擴(kuò)增和檢測(cè),無(wú)需額外試劑和優(yōu)化

  • 含dUTP的預(yù)混液,防止殘留物污染導(dǎo)致的假陽(yáng)性結(jié)果

 

 FUMM(含ROX) 系列 

當(dāng)然如果您的儀器需要進(jìn)行ROX校正,才能得到準(zhǔn)確的熒光結(jié)果,羅氏也能提供另外一系列試劑:FUMM預(yù)混液(含ROX校正染料)。

1. 實(shí)用性廣——可在所有熒光定量PCR儀上使用

  • 專門使用SYBR Green或者探針平臺(tái)進(jìn)行兩步法qPCR而設(shè)計(jì)的即用型熱啟動(dòng)反應(yīng)預(yù)混液,可幫您持續(xù)地獲得靈敏的、特異的和可重復(fù)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,幫您的基因表達(dá)研究實(shí)驗(yàn)提升信號(hào)品質(zhì)。

2. 設(shè)計(jì)*——非羅氏實(shí)時(shí)熒光PCR儀更適用

  • 該系列是在羅氏的熱啟動(dòng)PCR酶的基礎(chǔ)之上設(shè)計(jì)的,專門用于除了LightCycler系列儀器之外的所有其它實(shí)時(shí)定量PCR儀器平臺(tái),尤其適用于需要使用ROX校正染料的儀器平臺(tái)。(注:雖然適用于所有熒光定量PCR儀,但更優(yōu)于應(yīng)用在非羅氏且需要ROX校正的平臺(tái)上)。

  EvoScript一步法系列    

上述兩種預(yù)混試劑都是兩步法熒光定量的,即實(shí)驗(yàn)所用模板是DNA。另外我們還提供一步法所需預(yù)混試劑,即當(dāng)您的模板是RNA時(shí),無(wú)需采用兩步法先進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄實(shí)驗(yàn),再進(jìn)行熒光定量實(shí)驗(yàn),采用EvoScript系列一次實(shí)驗(yàn)即可完成您的熒光定量實(shí)驗(yàn)。

1. 品質(zhì)——性能*,易于使用

  • 采用單管包裝方便使用,使實(shí)驗(yàn)快速完成同時(shí)有效避免加樣誤差;性能*,高靈敏度檢測(cè),結(jié)果可重復(fù)性更好;一個(gè)酶完成反轉(zhuǎn)錄和熒光定量檢測(cè)實(shí)驗(yàn),更快速便捷獲得高特異性結(jié)果。

2. 應(yīng)用靈活——應(yīng)用范圍廣,防止污染

  • 支持各種樣本來(lái)源的RNA,解決您的擔(dān)憂;支持UNG酶,有效避免交叉污染和在RT-qPCR過程中引起的假陽(yáng)性和非特異性擴(kuò)增等。

 

 

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