免疫組織染色注意事項，1、概念和基本原理

免疫組織化學(xué)又稱免疫細胞化學(xué)，是指帶顯色劑標記的特異性抗體在組織細胞原位通過抗原抗體反應(yīng)和組織化學(xué)的呈色反應(yīng)，對相應(yīng)抗原進行定位、定性、半定量測定的一項新技術(shù)。它把免疫反應(yīng)的特異性和組織化學(xué)的可見性巧妙地結(jié)合起來，借助顯微鏡的現(xiàn)像和放大作用，在細胞、亞細胞水平檢測各種抗原物質(zhì)，并可在原位顯示相應(yīng)的基因和基因表達產(chǎn)物。免疫組織化學(xué)方法種類現(xiàn)已有：免疫熒光組織（細胞）化學(xué)技術(shù)、免疫酶組織（細胞）化學(xué)技術(shù)、親和組織化學(xué)技術(shù)、免疫金銀及鐵標記免疫組織化學(xué)技術(shù)等。

免疫熒光組織（細胞）化學(xué)技術(shù)是采用熒光素標記的已知抗體（或抗原）作為探針，檢測待測組織、細胞標本中的靶抗原（或抗體），形成的抗原抗體復(fù)合物上帶有熒光素，在熒光顯微鏡下，由于受高壓汞燈光源的紫外光照射，熒光素發(fā)出明亮的熒光，這樣就可以分辨出抗原（或抗體）的所在位置及其性質(zhì)，并可利用熒光定量技術(shù)計算抗原的含量，以達到對抗原物質(zhì)定位、定性、半定量測定的目的。

免疫組織染色注意事項，2、標本制作

免疫熒光一般用冰凍切片，減少雜質(zhì)干擾；而酶免疫組化一般用石蠟切片或冰凍切片均可以。

免疫組織染色注意事項，3、實驗步驟

免疫熒光染色步驟簡單，而酶免疫組化方法較為復(fù)雜，多了DAB顯色過程、脫水等步驟。

，4、染色后的標本保存

免疫熒光染色后的標本一般短時間拍照，時間長了熒光衰退，建議不要長期保存；而酶免疫組化染色切片經(jīng)過脫水、透明和封片等可以長期保存。